随着恶性肿瘤的年轻化以及生存率不断提高,生育力保存越来越成为患者和学者们关注的热点。而且随着冷冻技术的发展,生育力保存的可行性也进一步提高。
卵巢组织冷冻指的是冷冻卵巢皮质,薄薄一小片的卵巢皮质中就含有成千上万的始基卵泡。大体标本获取之后,卵巢皮质在实验室的超净台中被剥离出来,切成1cm左右的小薄片,浸入冷冻保护剂中,按照设定的冷冻程序,经慢速冷冻后置于液氮中长期保存。因为卵巢皮质细胞组成复杂,目前主流的冷冻技术还是慢速冷冻,只有日本的几家中心用玻璃化冷冻技术。值得一提的是,目前丹麦所实施的卵巢组织冷冻行生育力保存占据全球范围内的半壁江山,其配套的各项服务也非常完善。肿瘤患者如果在当地进行治疗和手术,可以把切除的卵巢组织放置于冰上,转运至有条件的实验室进行冷冻保存。
卵巢组织冷冻的适应症也在不断扩展。丹麦对于卵巢组织冷冻有自己的指南。患者如使用自体或异体免疫疗法(SCT)、高剂量烷化剂或高剂量照射等治疗而估计生命后期不孕的风险高(> 50%风险),以及患有其它原发性卵巢功能不全的疾病,可进行卵巢组织冷冻。经充分的知情同意后,排除手术禁忌症即可进行。冷冻卵巢组织只是生育力保存的步,(zui)终目的还要靠移植才可以实现。目前丹麦进行的卵巢组织冻融后移植周期共计97例。移植可以原位移植至卵巢中,也可异位移植至前壁腹膜或者盆腔侧壁上。移植前需要对冻融卵巢组织的功能进行评估,一般都采取尽可能多的方式全面评估,比如光镜、透射电镜、体外培养、异种移植到免疫缺陷小鼠等。移植回患者体内后,还可通过监测血FSH、LH水平以及B超监测卵泡发育等手段评估。
恶性肿瘤患者移植自体冻融卵巢组织后还是有风险的,因为卵巢组织是否含有恶性肿瘤细胞以及移植组织本身是否会导致癌症复发都是不确定的。
丹麦哥本哈根大学医学院的Claus-Y.Andersen教授
Andersen教授举了卵巢组织冷冻进行生育力保存的一个实例:卵巢肿瘤患者切除了一侧卵巢,对侧卵巢组织进行了冷冻保存。癌症治疗非常成功,患者在八年之后重返,移植了80%的卵巢皮质,其中一片卵巢皮质被移植到免疫缺陷小鼠中长达20周,卵泡发育良好。患者shou次妊娠,但于孕8周自然流产。后于2015年成功妊娠后诞下双胎,3个月后卵巢组织被去除。此患者的卵巢组织移植在体内的时间长达3年之久,并进行了再次冷冻保存。部分卵巢组织移植至免疫缺陷小鼠20周,卵泡发育良好。这些研究和尝试给了我们新的启示:
1. 可以年轻时进行生育力保存;
2. 当有生育要求时移植冻融组织;
3. 生育后,可以再次取出组织并重新冷冻;
4. 第二次移植后仍有存活的卵泡。
小结如下:
冷冻卵巢组织现在是一种成熟的技术;
移植冷冻/解冻组织对恢复卵巢功能和生育力有良好的疗效;
卵巢是内分泌器官,卵巢组织可长时间保持内分泌功能;
实际临床工作中的安全数据正在积累,但仍需要密切监测。